Q مضبوط اینیون جھلی کرومیٹوگرافی۔

 

2. مصنوعات کے فوائد

2.1 تیز اور موثر - روایتی رال سے 40 گنا زیادہ تیزی سے بہاؤ کی شرح پر اعلی پابند صلاحیت حاصل کرتا ہے۔ پیکڈ-بیڈ کرومیٹوگرافی کے مقابلے میں، میمبرین کرومیٹوگرافی کا استعمال کرتے ہوئے عمل کا وقت 30–40 گنا کم ہو جاتا ہے۔ عام آپریٹنگ بہاؤ کی شرح 10 MV/منٹ ہے۔

2.2 ہائی بائنڈنگ ایفیشننسی - جھلی کی کرومیٹوگرافی کم پریشر ڈراپ کی حالتوں میں زیادہ لوڈنگ کی صلاحیت اور اعلی بہاؤ کی شرح کو ظاہر کرتی ہے، جس سے چارج شدہ بائیو مالیکیولز کو ایک ہی پاس میں پکڑا جا سکتا ہے۔

2.3 توسیع پذیر اور لچکدار - جھلی کرومیٹوگرافی مصنوعات کی مکمل سیریز بائیو میکرومولیکول پیوریفیکیشن کی متنوع ضروریات کو پورا کر سکتی ہے، جس میں عمل کی نشوونما سے لے کر بڑے-پیمانے تک تمام مراحل کا احاطہ کیا جاتا ہے۔ کیپسول-قسم کا ساختی ڈیزائن ایک ہی-استعمال کے آپریشن اور صفائی کے بعد دوبارہ استعمال دونوں کو سپورٹ کرتا ہے۔

2.4 پیداواری صلاحیت کو بہتر بنائیں - کمپیکٹ ڈیزائن سہولت کے نقش کو کم سے کم کرتا ہے۔ کالم کی پیکنگ، صفائی، صفائی کی توثیق، اور کالم اسٹوریج آپریشنز کو ختم کرکے، اس عمل کو توازن کے لیے کم بفر کی ضرورت ہوتی ہے اور کالم کی تیاری کے بغیر براہ راست انجام دیا جاسکتا ہے۔ مزدوری کے اخراجات میں 50% تک کمی کی جا سکتی ہے۔

 

3. تکنیکی پیرامیٹر

3.1 ساختی مواد

	لیب پیمانہ	چھوٹے پیمانے پر	پائلٹ پیمانے	پیداوار کے پیمانے
جھلی کا حجم	0.2 ملی لیٹر	5 ملی لیٹر	140 ملی لیٹر	5L
جھلی کی حمایت کی ساخت:	پولی پروپیلین (پی پی)
جھلی ہاؤسنگ	پولی پروپیلین (پی پی)
اے انگوٹھی	سلیکون

 

3.2 آپریٹنگ خصوصیات

	لیب پیمانہ	چھوٹے پیمانے پر	پائلٹ پیمانے	پیداوار کے پیمانے
جھلی کا حجم	0.2 ملی لیٹر	5 ملی لیٹر	400 ملی لیٹر	5L
تجویز کردہ بہاؤ کی شرح	1-6 ملی لیٹر/منٹ	25-150ml/min	2-12L/منٹ	25-150L/منٹ
زیادہ سے زیادہ آپریٹنگ درجہ حرارت	35 ڈگری
زیادہ سے زیادہ آپریٹنگ دباؤ	3 بار (25 ڈگری)
زیادہ سے زیادہ دباؤ کا فرق	3 بار (25 ڈگری)
ذخیرہ کرنے کی شرائط:	20% ایتھنول آبی محلول

 

کیو میمبرین کرومیٹوگرافی کی سروس لائف ایگرز جیل کرومیٹوگرافی سے موازنہ ہے۔

 

 

شکل 1. BSA کی نگرانی میں متعدد استعمال کے بعد جھلی کی کرومیٹوگرافی لوڈنگ کی صلاحیت میں تبدیلیاں

مزید برآں، ہم نے میزبان سیل پروٹین اور نیوکلک ایسڈز کے لیے جھلی کرومیٹوگرافی کی ہٹانے کی کارکردگی کا جائزہ لیا۔ نتائج درج ذیل ہیں۔

	ڈی این اے				ایچ سی پی
	آئی جی جی ریکوری	RT PCR کے ذریعے مواد (IgG کا pg/mg)		ہٹانے کا عنصر	ایلیسا کا مواد (آئی جی جی کا ng/mg)		ہٹانے کا عنصر
دوڑو	%	کیو جھلی سے پہلے	کیو میمبرین کے بعد	لاگ	کیو جھلی سے پہلے	کیو میمبرین کے بعد	لاگ
1	96.7	423	1.2	2.55	7	4.8	0.16
2	97.4	438	1.3	2.53	7	4.9	0.15
3	94.7	513	1.3	2.60	6	1.9	0.50
4	95	32	0.9	1.55	6	4.2	0.15
5	96.3	45	1.1	1.61	8	5.2	0.19
6	96.5	158	0.7	2.35	8	6.2	0.11
7	96.4	267	1.9	2.15	9	7.2	0.10
8	96.8	298	2.3	2.11	9	8.2	0.04
9	97.1	746	1.5	2.70	4	2	0.30
10	96.6	39	1	1.59	4	1.5	0.43

ٹیبل 1. Q جھلی کرومیٹوگرافی کا استعمال کرتے ہوئے CHO- میں ظاہر کردہ IgG مواد میں DNA اور میزبان سیل پروٹین کو ہٹانے کی شرح

 

تجربات کی ایک سیریز نے یہ ثابت کیا کہ Q میمبرین کرومیٹوگرافی اعلی ہدف IgG کی بحالی کو برقرار رکھتے ہوئے نجاست کو مؤثر طریقے سے دور کر سکتی ہے۔

اس کے علاوہ، ہم نے درآمد شدہ برانڈز کے ساتھ گڈیلنگ میمبرین کرومیٹوگرافی کا موازنہ کیا، اور لوڈنگ کی صلاحیت کا ڈیٹا درج ذیل ہے:

لوڈنگ کی گنجائش (ملی گرام/ملی لیٹر)	سارٹوریئس	پال	رہنمائی کرنا
بی ایس اے	29	60	45
ایس او ڈی	25	40	35
پروٹین اے	27	45	40
ٹرپسن	30	56	44

جدول 2۔ ہماری مصنوعات اور حریف مصنوعات پر مختلف پروٹینوں کی لوڈنگ کارکردگی

مجموعی تشخیص سے پتہ چلتا ہے کہ ہماری لوڈنگ کی صلاحیت درآمد شدہ مصنوعات کے مقابلے کے قابل ہے،

تصویر 2۔کیو میمبرین کرومیٹوگرافی ماڈیول کا استعمال کرتے ہوئے، BSA کو بائنڈنگ صلاحیت کا اندازہ کرنے کے لیے معیاری پروٹین کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ متحرک بائنڈنگ صلاحیت کا موازنہ درآمد شدہ مصنوعات کے ساتھ کیا گیا۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ زیادہ تر ٹارگٹ پروٹین کو پکڑا جاسکتا ہے اور اس کے ساتھ ایلوٹ کیا جاسکتا ہے۔150 ایم ایم NaClBSA کو بطور ماڈل پروٹین استعمال کرتے وقت۔

مختلف الیشن حالات کے ذریعے، ہم نے پایا کہ جھلی کرومیٹوگرافی کا ایلیوشن سلوک ایگرز جیل کرومیٹوگرافی سے ملتا جلتا ہے۔ مختلف نمک کے ارتکاز پر خارج ہونے والے پروٹین کی پاکیزگی نمایاں طور پر مختلف ہوتی ہے۔ اصل عمل کی نشوونما اور پیداوار میں، اعلی پاکیزگی کے ساتھ ہدف پروٹین حاصل کرنے کے لیے اخراج کے بہترین حالات کا مقداری طور پر تعین کرنا ضروری ہے۔

 

4. عام درخواست کیس

ڈی این اے، وائرس، میزبان سیل پروٹین (HCP)، اور اینڈوٹوکسین کو ہٹانا

پلازمیڈ، وائرس، اور پروٹین کی گرفتاری کے ساتھ ساتھ اولیگونوکلیوٹائڈس کو صاف کرنا

 

5. آپریٹنگ طریقہ کار

5.1: سامان کی تیاری اور اسمبلی:

5.1.1: AKTA کرومیٹوگرافی سسٹم: میمبرین کرومیٹوگرافی ماڈیول کو پیکڈ کالموں کی طرح انسٹال کریں۔ یقینی بنائیں کہ ماڈیول پر تیر کی سمت فیڈ کے بہاؤ کی سمت کے مطابق ہے۔ Luer کنیکٹرز یا Tri-Clamp Fittings کا استعمال کرتے ہوئے سسٹم کو جوڑیں۔

5.1.2 انلیٹ فلو ریٹ کو 5–10 MV/منٹ پر سیٹ کریں اور سسٹم سے ہوا نکالنے کے لیے ایکولبریشن بفر کا استعمال کریں۔ اس بات کو یقینی بنانے کے بعد کہ آؤٹ لیٹ اسٹریم میں ہوا کے بلبلے نہیں ہیں، پرمییٹ آؤٹ لیٹ کو کرومیٹوگرافی سسٹم سے جوڑیں۔

5.2: استعمال سے پہلے-علاج:

5.2.1:

Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 MV اس بات کو یقینی بنانے کے لیے کہ جھلی توازن تک پہنچ جائے۔

5.2.2:

At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 MV اس بات کو یقینی بنانے کے لیے کہ جھلی توازن تک پہنچ جائے۔

5.3 کرومیٹوگرافی کا عمل

5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 MV جب تک کہ جھلی توازن تک نہ پہنچ جائے۔

5.3.2 0.22 μm فلٹر کے ذریعے نمونے کو پہلے سے-فلٹر کرنے کے بعد، اسے کالم پر لوڈ کریں جب تک کہ پورا نمونہ لاگو نہ ہو جائے یا کرومیٹوگرافی بائنڈنگ صلاحیت تک پہنچ جائے۔

5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 MV جب تک کہ UV سگنل بیس لائن پر گر جائے۔

5.3.4 ڈیزائن کردہ پروٹوکول کے مطابق گریڈینٹ یا لکیری اخراج انجام دیں، اور ضرورت کے مطابق فریکشن جمع کریں۔

5.4 CIP پوسٹ-علاج کا استعمال کریں – میمبرین کرومیٹوگرافی ڈیوائس CIP

5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 MV جب تک کہ UV سگنل بیس لائن سے نیچے نہ گر جائے۔

5.4.2 30 منٹ تک گردش کرنے کے بعد، پی ایچ 7-8 تک پہنچنے تک واٹر واش پر سوئچ کریں، پھر 20٪ ایتھنول پر سوئچ کریں اور جب تک چالکتا مستحکم نہ ہو دھونا جاری رکھیں۔

5.5، میمبرین کرومیٹوگرافی اسٹوریج:

CIP کے استعمال اور تکمیل کے بعد، جھلی کے ماڈیول کو 20% ایتھنول میں جدا اور ذخیرہ کیا جا سکتا ہے، یا 20% ایتھنول میں کمرے کے درجہ حرارت پر آن لائن رکھا جا سکتا ہے۔ ایتھنول محلول کو وقتاً فوقتاً تبدیل اور معائنہ کیا جانا چاہیے۔

 

6. آرڈرنگ کی معلومات

Q Strong Anion-Exchange Membrane Chromatography Capsule Filter

	لیب پیمانہ	چھوٹے پیمانے پر	پائلٹ پیمانے	پیداوار کے پیمانے
پروڈکٹ ماڈل	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
جھلی کا حجم	0.2 ملی لیٹر	5 ملی لیٹر	400 ملی لیٹر	5L

ڈاؤن لوڈ، اتارنا ٹیگ: q مضبوط anion جھلی کرومیٹوگرافی، چین، سپلائرز، مینوفیکچررز، فیکٹری، تھوک، بلک، اسٹاک میں، مفت نمونہ