Endotoxin ہٹانے پر مختلف تاکنا سائز کے ساتھ الٹرا فلٹریشن جھلیوں کا اثر

ہمارے اعداد و شمار کے مطابق، زیادہ تر معاملات میں، 10kd یا اس سے کم کے میمبرین اپرچر والی جھلی کیسٹوں کا انتخاب مؤثر طریقے سے زیادہ تر اینڈوٹوکسین کو روک سکتا ہے، اینڈوٹوکسین کے مواد کو بہت کم سطح تک کم کر سکتا ہے، اور زیادہ تر طبی اور دواسازی کی صنعت کی ایپلی کیشنز کی ضروریات کو پورا کر سکتا ہے۔ اینڈوٹوکسین مواد کو کم کرنے کی سطح مختلف تاکنا سائز کے ساتھ مختلف تھی۔ اس پہلو کو مدنظر رکھتے ہوئے ہم نے کچھ تحقیق کی ہے جس کا مواد درج ذیل ہے۔

 

اینڈوٹوکسین کیا ہے؟

Endotoxin، جسے lipopolysaccharide، lipid A، حرارت کا ذریعہ بھی کہا جاتا ہے، گرام منفی بیکٹیریا (GNB) کی خلیے کی دیوار کی بیرونی دیوار پر ایک منفرد ڈھانچہ ہے، اور یہ اعلی رشتہ دار مالیکیولر وزن کا ایک کمپلیکس ہے۔ اینڈوٹوکسین کی کیمیائی ہیٹروجنیٹی کی وجہ سے، مختلف ذرائع سے اینڈوٹوکسین کا رشتہ دار مالیکیولر ماس ہزاروں سے دسیوں ہزار تک مختلف ہو سکتا ہے، اور اینڈوٹوکسین کی ایمفیفیلیسیٹی کی وجہ سے، یہ پانی میں ایک ایسوسی ایشن بنا سکتا ہے، اور اس کی ایسوسی ایشن کا رشتہ دار مالیکیولر ماس۔ 400،000 سے 1،000،000 تک پہنچ سکتے ہیں۔

 

اینڈوٹوکسین کو کیوں ہٹانا چاہئے۔

1. اینڈوٹوکسین کا کردار

Endotoxin ستنداریوں پر ایک اہم تھرموجینک اثر رکھتا ہے۔ بیکٹیریا اس وقت زہریلے ہو جاتے ہیں جب وہ مر جاتے ہیں یا دوسرے خلیات سے چپک جاتے ہیں۔ اینڈوٹوکسین کی تھوڑی مقدار (2 این جی/کلوگرام جسمانی وزن) نس کے ذریعے انجکشن کے ذریعے بخار کا سبب بن سکتی ہے، اور زیادہ مقداریں دوران خون میں خلل اور اینڈوٹوکسن جھٹکا کا سبب بن سکتی ہیں۔ نیشنل فارماکوپیا کی دفعات کے مطابق، کسی دوا یا تیاری میں اینڈوٹوکسین کا مواد مقررہ حد سے کم ہونا چاہیے۔ مثال کے طور پر، انسانی خون کے البومین کے لیے، حیاتیاتی مصنوعات کے بیکٹیریل اینڈوٹوکسن کے ٹیسٹ کے طریقہ کار کے مطابق بیکٹیریل اینڈوٹوکسین مواد کی حد 2 EU/mL سے کم ہونی چاہیے۔ انٹرفیرون میں بیکٹیریل اینڈوٹوکسین کی حد 10 EU/mL سے کم ہونی چاہیے۔

 

2. Endotoxin آلودگی

Endotoxin vivo اور vitro دونوں میں واضح حیاتیاتی اثرات رکھتا ہے۔ مفت سیل سسٹمز میں، نینوگرام کی تعداد میں اینڈوٹوکسین مخصوص قسم کے خلیات اور یہاں تک کہ مالیکیولز کے رویے کو متاثر کر سکتے ہیں، اس طرح عام جسمانی سرگرمیاں متاثر ہوتی ہیں۔

لہذا، اینڈوٹوکسین زیادہ تر حیاتیاتی مواد کی آلودگی کا ذریعہ ہے، اور اس کا وجود بہت سے حیاتیاتی اور منشیات کے ٹیسٹوں کے افراتفری کے نتائج کو ظاہر کرتا ہے، جو پیداوار میں بہت سی مشکلات لاتا ہے۔

(1) منشیات کی آلودگی۔ مثال کے طور پر، کیمیائی طریقوں سے تیار کردہ مغربی ادویات اور پودوں سے نکالی جانے والی روایتی چینی ادویات ان کی ترکیب یا نکالنے کے دوران اینڈوٹوکسین سے آلودہ ہو سکتی ہیں۔

(2) پیداوار کے لیے خام مال۔ تیاری کے عمل کے دوران خون کی مختلف مصنوعات اور سیل میڈیا بھی کم و بیش آلودہ ہو سکتے ہیں۔

(3) حیاتیاتی ایجنٹ۔ مثال کے طور پر، انٹرفیرون، انٹرلییوکن یا مختلف علاجی پروٹینز یا پیپٹائڈس جو ریکومبیننٹ ڈی این اے ٹکنالوجی سے تیار کیے گئے ہیں، مینوفیکچرنگ کے عمل میں اظہار کے ایک کیریئر کے طور پر ای کولی کا استعمال، یا مختلف بیرونی عوامل، اینڈوٹوکسین آلودگی سے بچنا مشکل ہے۔

 

الٹرا فلٹریشن کے ذریعہ اینڈوٹوکسین کو ہٹانے کا خیال

اینڈوٹوکسین کے بڑے رشتہ دار مالیکیولر ماس کی وجہ سے، الٹرا فلٹریشن جھلیوں کو پانی سے اینڈوٹوکسین کو ہٹانے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ الٹرا فلٹریشن جھلی کے تاکنا کے سائز اور مواد کا انتخاب علاج کی جارہی دوائی کے نسبتا مالیکیولر وزن، خصوصیات اور پائروجن مواد پر منحصر ہے۔ زیادہ تر پائروجن کو برقرار رکھنے کے لیے، 5000 یا 10000 کے رشتہ دار مالیکیولر ماس کے ساتھ الٹرا فلٹریشن میمبرین کا استعمال کرنا ضروری ہے، اس وقت آپریشن کے دوران دباؤ زیادہ ہوتا ہے، اور یہ کچھ دواسازی کی تیاریوں کے لیے موزوں نہیں ہوتا جس میں بڑے رشتہ دار مالیکیولر ماس ہوتا ہے۔ اجزاء کیونکہ پائروجن کو ہٹانے سے مائع میں موثر اجزاء برقرار رہے گا یا جذب ہو جائے گا، اور مصنوعات کی پیداوار بہت متاثر ہوتی ہے۔

چونکہ اینڈوٹوکسین مالیکیول غیر جانبدار حالات میں منفی طور پر چارج کیے جاتے ہیں، اس لیے مثبت چارج شدہ مواد جیسے پولی سلفون، پولی کریلونیٹریل، پولیامائیڈ اور دیگر مائیکرو پورس فلٹریشن جھلیوں کا انتخاب اینڈوٹوکسن مالیکیولز کے خاتمے کے اثر کو بڑھا سکتا ہے۔ اس کے علاوہ، یہ سیلولوز فلم پر ڈائیٹومیسیئس ارتھ کو داغ دینے کا ایک طریقہ بھی ہے، اور پھر اینڈوٹوکسین کو ہٹانے کے لیے اس پر مثبت پولی الیکٹرولائٹ جذب کرتا ہے۔ تاہم، اینڈوٹوکسین پر ان چارج شدہ مائکروپورس جھلیوں کے ہٹانے کا اثر پی ایچ سے بہت متاثر ہوا تھا۔ گائیڈلنگ ٹیکنالوجی کے گہرے فلٹر میں ڈائیٹومیسیئس ارتھ ہے، جسے آزادانہ طور پر منتخب کیا جا سکتا ہے کہ آیا صارف کے عمل کے مطابق مثبت چارج شامل کرنا ہے۔ خلیات، خلیے کے ملبے اور متفرق پروٹین جیسی نجاستوں کو دور کرنے کے عمل میں، اس کی اندرونی قدرتی غیر محفوظ ساخت جھلی کے فلٹریشن کے بوجھ کو بڑھا سکتی ہے۔

 

مختلف تاکنا سائز کے ساتھ الٹرا فلٹریشن جھلیوں کا اینڈوٹوکسن ہٹانے کا اثر

 

یہاں ہم اینڈوٹوکسین ہٹانے کے معاملات کے متعدد مختلف ذرائع سے الٹرا فلٹریشن جھلیوں کے ہٹانے کے اثر پر تبادلہ خیال کرتے ہیں:

1. الٹرا فلٹریشن طریقہ سے شینگمائی انجیکشن میں بیکٹیریل اینڈوٹوکسین کو ہٹانا

1.1 تعارف

پلس انجیکشن ایک قسم کا جراثیم سے پاک پانی کا محلول ہے جو پلس SAN سے خوراک کی شکل میں اصلاحات کے ذریعے بنایا جاتا ہے۔ یہ سرخ ginseng، ophiopogon اور schisandra schisandrae پر مشتمل ہے۔ یہ کیوئ پلس کو متحرک کرنے، پانی کی کمی کو مضبوط اور مستحکم کرنے، بلڈ پریشر کو مستحکم کرنے، مایوکارڈیل کنٹریکٹائل فورس کو بڑھانے کے فائدہ مند اثرات رکھتا ہے، اور قلبی نظام اور اینڈوکرائن کی بیماریوں کے علاج میں اچھا طبی اثر رکھتا ہے۔

 

1.2 جھلی کے اجزاء

گائیڈنگ الٹرا فلٹریشن جھلی (انٹرسیپشن رشتہ دار مالیکیولر ماس 10,30,100 kDa)

 

1.3 تجرباتی طریقے

1.3.1 نبض پیدا کرنے والے مائع انٹرمیڈیٹس کی تیاری

نیشنل ڈرگ اسٹینڈرڈ (WS3-B-2865-98-2011) میں Zhongsheng Mai انجیکشن کی تیاری کے عمل اور اس پر نظر ثانی (ZGB2011-48) کا حوالہ دیں۔ ریڈ ginseng کا 100 گرام وزن، 312 جی اوفیوپوگن اور 156 جی شیزندرا چنینسس، ریڈ ginseng کو ایتھنول ریفلکس طریقہ سے نکالا گیا تھا، اور اوفیوپوگون چنینسس اور شیزنڈرا چنینسس کو بھاپ کی کشید کے طریقہ کار سے نکالا گیا تھا، اور 1L 1L پروڈکٹ میڈیسن کے ذریعے نکالا گیا تھا۔ ہر 10 ملی لیٹر سرخ ginseng کے 1 جی کے برابر تھا، 3 جی اوفیوپوگن اور 1.5 جی سکسنڈرا چنینسس)۔

 

1.3.2 الٹرا فلٹریشن

نبض بنانے والے مائع انٹرمیڈیٹ کی ایک خاص مقدار لی گئی، پی ایچ کو 7.5 پر ایڈجسٹ کیا گیا، اور پانی سے علاج کیے جانے والے الٹرا فلٹریشن سسٹم میں رکھا گیا۔ پولیتھر الٹرا فلٹریشن جھلی کے 10,30,100 kDa رشتہ دار مالیکیولر وزن کے وقفے کے بعد الٹرا فلٹریشن کیا گیا تھا، اور الٹرا فلٹریشن سائیکل 60 منٹ تک متوازن تھا۔ الٹرا فلٹریشن مکمل ہونے کے بعد، ginsenoside Rg1، Re، Rb1 اور schisandrin A کی بازیابی کی شرح (R) کا حساب لگایا گیا۔ الٹرا فلٹریشن سے پہلے اور بعد میں بیکٹیریل اینڈوٹوکسن کے مواد کو مقداری طور پر متحرک ٹربائڈیٹی طریقہ سے ماپا گیا تھا، اور مائع میں بیکٹیریل اینڈوٹوکسن کے اخراج کی شرح کا حساب لگایا گیا تھا (Q)۔

R=ایک فلٹر /A قدیم ×100%

Q= (C -C فلٹر) /C × 100%

فارمولے میں، A الٹرا فلٹریٹ میں ہر ایک فعال جزو کا چوٹی کا علاقہ ہے، A اصل دوا کے محلول میں ہر ایک فعال جزو کا چوٹی کا علاقہ ہے، C الٹرا فلٹریٹ میں بیکٹیریل اینڈوٹوکسین کا مواد ہے، اور C بیکٹیریل کا مواد ہے۔ اصل دوا کے حل میں اینڈوٹوکسین۔

 

1.4 فعال اجزاء کی پارگمیتا کا تعین

After ultrafiltration of two kinds of ultrafiltration membranes (with the relative molecular weight of 10, 30, 100kDa retained), the permeability of each active component is shown in Table 1. The results showed that with the increase of membrane pore size, the permeability of effective components increased correspondingly. When the pore size of the membrane reaches 100 kDa, the permeability of the effective components is equal to >. 90%، اور تینوں فعال اجزاء 100 kDa الٹرا فلٹریشن جھلی سے گزر سکتے ہیں۔ کرومیٹوگرام سے پہلے اور بعد میں 100 kDa جھلی الٹرا فلٹریشن حل میں ہر ایک فعال جزو کے چوٹی کے علاقے کا موازنہ HPLC نے کیا، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ تقریباً 4 اجزاء کا کوئی نقصان نہیں ہوا۔

 

1.5 بیکٹیریل اینڈوٹوکسین کے ہٹانے کے اثر پر مطالعہ

الٹرا فلٹریشن جھلی کے ذریعے الٹرا فلٹریشن سے پہلے اور بعد میں نبض پیدا کرنے والے مائع انٹرمیڈیٹس میں بیکٹیریل اینڈوٹوکسن کے مواد میں تبدیلیاں جدول 2 میں دکھائی گئی ہیں۔ نتائج سے معلوم ہوا کہ مختلف مالیکیولر وزن کے ساتھ الٹرا فلٹریشن کے بعد اصل مائع میں اینڈوٹوکسین کے مواد میں نمایاں کمی واقع ہوئی ہے۔ 100 kDa الٹرا فلٹریشن میمبرین الٹرا فلٹریشن کے بعد، مائع میں اینڈوٹوکسین کا مواد کلینیکل شینگمائی انجیکشن میں 5.0EU·mL-1 کی حد قدر سے بہت کم تھا۔

1.6 بحث

اس مقالے میں، PSO سے بنی الٹرا فلٹریشن جھلی کے اثر کی بنیاد پر، یہ پایا گیا کہ ginsenoside Rg1,Re,Rb1 اور schisandra A کا تقریباً کوئی نقصان نہیں ہوا تھا جب 100 kDa کے انٹرسیپشن رشتہ دار مالیکیولر وزن کے ساتھ الٹرا فلٹریشن جھلی کا استعمال کیا گیا تھا، اور بیکٹیریل اینڈوٹوکسنز طبی حد کی ضروریات کو پورا کرتے ہوئے مائع کو مؤثر طریقے سے ہٹایا جا سکتا ہے۔ پائروجن کو ہٹانے کے لیے ایکٹیویٹڈ کاربن کے مقابلے میں، الٹرا فلٹریشن ٹیکنالوجی نہ صرف مسابقتی جذب اور جذب سیچوریشن کے مسائل کو ختم کر سکتی ہے، بلکہ بڑی حد تک انجیکشن کی حفاظت کی ضمانت بھی دے سکتی ہے، اور شینگمائی انجیکشن کی تیاری کے عمل کے لیے تجرباتی بنیاد فراہم کر سکتی ہے۔

 

2. عام نمکین کے پائروجن کو ہٹانے کے عمل پر 10kd مالیکیولر وزن کے ساتھ انٹرسیپشن الٹرا فلٹریشن جھلی کا اثر

 

2.1 تعارف

پائروجن سے پاک حیاتیاتی مصنوعات کی تیاری میں اکثر یہ سامنا کرنا پڑتا ہے کہ exogenous endotoxin زیادہ پائیروجن کا سبب بنتا ہے، اور برتنوں کو خشک بیکنگ اور سوڈیم ہائیڈرو آکسائیڈ بھگو کر حل کیا جا سکتا ہے، لیکن بڑے پیمانے پر محلول کی تیاری مذکورہ بالا علاج کے لیے موزوں نہیں ہے۔ اور یہ قابل غور اینڈوٹوکسین مواد حاصل کرنے کے لیے بڑے پیمانے پر حل کے لیے ٹینجینٹل فلو فلم پیکیجنگ کا استعمال کرنے پر غور کیا جاتا ہے۔

 

2.2 اینڈوٹوکسن کو ہٹانا

2.2.1 نمونوں کا الٹرا فلٹریشن ٹریٹمنٹ

بیکٹیریل اینڈوٹوکسین بیکٹیریا سے بہت چھوٹا ہوتا ہے، جس کا قطر تقریباً 1-50nm ہوتا ہے، لپڈ A چھوٹا، چھوٹا سائز اور ہلکا وزن ہوتا ہے، اور بیکٹیریل اینڈوٹوکسن میں گرمی کی اچھی مزاحمت ہوتی ہے۔ عام طور پر، ٹینجینٹل فلو الٹرا فلٹریشن میمبرین پیکیج 10kd کا استعمال اینڈوٹوکسین کو روکنے اور محلول کے ذریعے ٹینجینٹل بہاؤ لینے کے لیے کیا جاتا ہے۔

2.2.3 تجرباتی نتائج

گائیڈلنگ ٹیکنالوجی نے فیڈ مائع پر مائیکرو فلٹریشن تجربہ کرنے کے لیے PES میٹریل 10kd میمبرین کیسٹ کا استعمال کیا، اور نتائج درج ذیل ہیں:

نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ گائیڈلنگ ٹیکنالوجی کے ذریعہ تیار کردہ 10kd کے انٹرسیپشن مالیکیولر وزن کے ساتھ الٹرا فلٹریشن میمبرین کیسٹ مؤثر طریقے سے اینڈوٹوکسین کو ہٹا سکتی ہے اور پیداوار کو مزید بڑھا سکتی ہے۔

 

گائیڈلنگ کے بارے میں

گائیڈلنگ ٹیکنالوجی ایک قومی ہائی ٹیک انٹرپرائز ہے جو بائیو فارماسیوٹیکلز، سیل کلچر، بائیو میڈیسن کی تطہیر اور ارتکاز، تشخیص اور صنعتی سیالوں پر توجہ مرکوز کرتی ہے۔ ہم نے کامیابی کے ساتھ سینٹری فیوگل فلٹر ڈیوائسز، الٹرا فلٹریشن اور مائیکرو فلٹریشن کیسٹس، وائرس فلٹر، TFF سسٹم، ڈیپتھ فلٹر، ہولو فائبر وغیرہ تیار کیے ہیں۔ ہماری جھلیوں اور جھلیوں کے فلٹر بڑے پیمانے پر ارتکاز، نکالنے اور پری فلٹریشن، مائیکرو فلٹریشن، الٹرا فلٹریشن اور نینو فلٹریشن میں استعمال ہوتے ہیں۔ ہماری بہت سی پروڈکٹ لائنیں، چھوٹی، واحد استعمال کی لیبارٹری فلٹریشن سے لے کر پروڈکشن فلٹریشن سسٹم، سٹرلٹی ٹیسٹنگ، فرمینٹیشن، سیل کلچر اور مزید، جانچ اور پیداوار کی ضروریات کو پورا کرتی ہیں۔ گائیڈلنگ ٹیکنالوجی آپ کے ساتھ تعاون کرنے کے منتظر ہے!